मॉडिक बदलांचे प्राणी मॉडेल तयार करण्यासाठी ऑटोलॉगस न्यूक्लियस पल्पोसस कमरेसंबंधी सबकॉन्ड्रल हाडात रोपण केले

निसर्ग.कॉमला भेट दिल्याबद्दल धन्यवाद. आपण वापरत असलेल्या ब्राउझर आवृत्तीमध्ये मर्यादित सीएसएस समर्थन आहे. सर्वोत्कृष्ट निकालांसाठी, आम्ही नवीन ब्राउझर (किंवा इंटरनेट एक्सप्लोररमध्ये सुसंगतता मोड अक्षम करणे) वापरण्याची शिफारस करतो. दरम्यान, सतत समर्थन सुनिश्चित करण्यासाठी आम्ही शैली आणि जावास्क्रिप्टशिवाय साइट प्रदर्शित करू.
एमसीचा अभ्यास करण्यासाठी मॉडिक चेंज (एमसी) च्या प्राण्यांच्या मॉडेल्सची स्थापना हा एक महत्त्वाचा आधार आहे. न्यूझीलंडच्या पंचवीस पांढर्‍या सशांना शॅम-ऑपरेशन ग्रुप, स्नायू रोपण गट (एमई ग्रुप) आणि न्यूक्लियस पल्पोसस इम्प्लांटेशन ग्रुप (एनपीई ग्रुप) मध्ये विभागले गेले. एनपीई गटात, इंटरव्हर्टेब्रल डिस्क एंटेरोलेट्रल लंबर सर्जिकल पध्दतीद्वारे उघडकीस आणली गेली आणि शेवटच्या प्लेटजवळ एल 5 कशेरुकाच्या शरीरावर पंचर करण्यासाठी सुई वापरली गेली. एनपीला सिरिंजद्वारे एल 1/2 इंटरव्हर्टेब्रल डिस्कमधून काढले गेले आणि त्यात इंजेक्शन दिले. सबकॉन्ड्रल हाडात एक छिद्र ड्रिल करणे. स्नायू रोपण गट आणि शॅम-ऑपरेशन ग्रुपमधील शल्यक्रिया आणि ड्रिलिंग पद्धती एनपी इम्प्लांटेशन ग्रुपमधील सारख्याच होत्या. एमई ग्रुपमध्ये, स्नायूंचा एक तुकडा छिद्रात ठेवला गेला, तर शॅम-ऑपरेशन ग्रुपमध्ये, काहीच भोकात ठेवले नाही. ऑपरेशननंतर, एमआरआय स्कॅनिंग आणि आण्विक जैविक चाचणी घेण्यात आली. एनपीई गटातील सिग्नल बदलला, परंतु शॅम-ऑपरेशन ग्रुप आणि एमई ग्रुपमध्ये कोणताही स्पष्ट सिग्नल बदल झाला नाही. हिस्टोलॉजिकल निरीक्षणावरून असे दिसून आले की रोपण साइटवर असामान्य ऊतकांचा प्रसार पाळला गेला आणि एनपीई गटात आयएल -4, आयएल -17 आणि आयएफएन- of चे अभिव्यक्ती वाढविली गेली. सबकॉन्ड्रल हाडात एनपीची रोपण एमसीचे प्राणी मॉडेल तयार करू शकते.
मॉडिक बदल (एमसी) हे कशेरुकाच्या एंडप्लेट्सचे घाव आणि मॅग्नेटिक रेझोनान्स इमेजिंग (एमआरआय) वर दृश्यमान लगतच्या अस्थिमज्जाचे घाव आहेत. ते संबंधित लक्षणे 1 असलेल्या व्यक्तींमध्ये सामान्य आहेत. कमी पाठदुखीच्या (एलबीपी) २,3 च्या संबद्धतेमुळे अनेक अभ्यासानुसार एमसीच्या महत्त्ववर जोर देण्यात आला आहे. डी रुस एट अल .4 आणि मोडिक एट अल .5 स्वतंत्रपणे प्रथम कशेरुकाच्या अस्थिमज्जामध्ये तीन वेगवेगळ्या प्रकारच्या सबकॉन्ड्रल सिग्नल विकृतींचे वर्णन केले. मॉडिक प्रकार I बदल टी 1-वेटेड (टी 1 डब्ल्यू) सीक्वेन्सवर हायपोइन्टेन्स आणि टी 2-वेटेड (टी 2 डब्ल्यू) अनुक्रमांवर हायपरइंटेन्स आहेत. हा घाव अस्थिमज्जामध्ये विच्छेदन एंडप्लेट्स आणि जवळील व्हॅस्क्यूलर ग्रॅन्युलेशन ऊतक प्रकट करतो. मॉडिक प्रकार II बदल टी 1 डब्ल्यू आणि टी 2 डब्ल्यू दोन्ही अनुक्रमांवर उच्च सिग्नल दर्शवितात. या प्रकारच्या जखमांमध्ये, एंडप्लेट विनाश आढळू शकतो, तसेच जवळच्या अस्थिमज्जाची हिस्टोलॉजिकल फॅटी बदलणे देखील आढळू शकते. मॉडिक प्रकार III बदल टी 1 डब्ल्यू आणि टी 2 डब्ल्यू सीक्वेन्समध्ये कमी सिग्नल दर्शवितात. एंडप्लेट्सशी संबंधित स्क्लेरोटिक घाव 6 साजरा केला गेला आहे. एमसी हा पाठीचा एक पॅथॉलॉजिकल रोग मानला जातो आणि स्पाइन 7,8,9 च्या अनेक विकृत रोगांशी संबंधित आहे.
उपलब्ध डेटा लक्षात घेता, अनेक अभ्यासांनी एमसीच्या एटिओलॉजी आणि पॅथॉलॉजिकल यंत्रणेबद्दल तपशीलवार अंतर्दृष्टी प्रदान केली आहे. अल्बर्ट इट अल. सुचवले की एमसी डिस्क हर्निएशन 8 द्वारे होऊ शकते. हू एट अल. एमसीला गंभीर डिस्क डीजेनेरेशन 10 चे श्रेय दिले. केआरओसीने “अंतर्गत डिस्क फुटणे” ही संकल्पना प्रस्तावित केली, ज्यात असे म्हटले आहे की पुनरावृत्ती डिस्कच्या आघातामुळे एंडप्लेटमध्ये मायक्रोटेर होऊ शकतात. फाटलेल्या निर्मितीनंतर, न्यूक्लियस पल्पोसस (एनपी) द्वारे एंडप्लेट नष्ट केल्याने ऑटोइम्यून प्रतिसाद मिळू शकतो, ज्यामुळे एमसी 11 च्या विकासास कारणीभूत ठरते. मा इट अल. समान मत सामायिक केले आणि नोंदवले की एनपी-प्रेरित ऑटोइम्यूनिटी एमसी 12 च्या रोगजनकात महत्त्वपूर्ण भूमिका बजावते.
रोगप्रतिकारक शक्ती पेशी, विशेषत: सीडी 4+ टी मदतनीस लिम्फोसाइट्स, ऑटोइम्यूनिटी 13 च्या रोगजनकात महत्त्वपूर्ण भूमिका बजावतात. अलीकडेच शोधलेल्या थ 17 सबसेटमध्ये प्रोनिफ्लेमेटरी सायटोकीन आयएल -17 तयार होते, केमोकिन अभिव्यक्तीला प्रोत्साहन मिळते आणि खराब झालेल्या अवयवांमध्ये टी पेशींना आयएफएन- 1414 उत्पादन करण्यास उत्तेजित होते. रोगप्रतिकारक प्रतिक्रियांच्या रोगजनकात टीएच 2 पेशी देखील एक अद्वितीय भूमिका निभावतात. प्रतिनिधी म्हणून आयएल -4 च्या अभिव्यक्तीमुळे गंभीर इम्युनोपैथोलॉजिकल परिणाम 15 होऊ शकतात.
जरी अनेक क्लिनिकल अभ्यास एमसी 16,17,18,19,20,21,22,23,24 वर घेण्यात आले आहेत, तरीही अद्याप योग्य प्राण्यांच्या प्रयोगात्मक मॉडेल्सचा अभाव आहे जो एमसी प्रक्रियेची नक्कल करू शकतो जो मानवांमध्ये वारंवार होतो आणि असू शकतो एटिओलॉजी किंवा लक्ष्यित थेरपीसारख्या नवीन उपचारांची तपासणी करण्यासाठी वापरले जाते. आजपर्यंत, एमसीच्या केवळ काही प्राण्यांच्या मॉडेल्समध्ये मूलभूत पॅथॉलॉजिकल यंत्रणेचा अभ्यास करण्यासाठी नोंदवले गेले आहे.
अल्बर्ट आणि एमए यांनी प्रस्तावित केलेल्या ऑटोइम्यून सिद्धांतावर आधारित, या अभ्यासाने ड्रिल्ड व्हर्टेब्रल एंड प्लेटजवळ ऑटोट्रांसप्लांटिंग एनपीद्वारे एक साधे आणि पुनरुत्पादक ससा एमसी मॉडेल स्थापित केले. इतर उद्दीष्टे म्हणजे प्राण्यांच्या मॉडेल्सच्या हिस्टोलॉजिकल वैशिष्ट्यांचे निरीक्षण करणे आणि एमसीच्या विकासामध्ये एनपीच्या विशिष्ट यंत्रणेचे मूल्यांकन करणे. यासाठी, आम्ही एमसीच्या प्रगतीचा अभ्यास करण्यासाठी आण्विक जीवशास्त्र, एमआरआय आणि हिस्टोलॉजिकल अभ्यास यासारख्या तंत्रे वापरतो.
शस्त्रक्रियेदरम्यान रक्तस्त्राव झाल्यामुळे दोन ससे मरण पावले आणि एमआरआय दरम्यान भूल देताना चार ससे मरण पावले. उर्वरित 48 ससे टिकून राहिले आणि शस्त्रक्रियेनंतर कोणतेही वर्तनात्मक किंवा न्यूरोलॉजिकल चिन्हे दर्शविली नाहीत.
एमआरआय दर्शविते की वेगवेगळ्या छिद्रांमध्ये एम्बेडेड टिशूची सिग्नल तीव्रता भिन्न आहे. एनपीई गटातील एल 5 व्हर्टेब्रल बॉडीची सिग्नल तीव्रता हळूहळू 12, 16 आणि 20 आठवड्यांनंतर बदलल्यानंतर (टी 1 डब्ल्यू सीक्वेन्सने कमी सिग्नल दर्शविला, आणि टी 2 डब्ल्यू सीक्वेन्सने मिश्रित सिग्नल प्लस लो सिग्नल दर्शविला) (चित्र 1 सी), तर एमआरआय दिसू एम्बेड केलेल्या भागांच्या इतर दोन गटांपैकी समान कालावधीत तुलनेने स्थिर राहिले (चित्र 1 ए, बी).
(अ) ससा कमरेच्या मणक्याचे प्रतिनिधी अनुक्रमे एमआरआय 3 वेळेच्या बिंदूंवर. शॅम-ऑपरेशन ग्रुपच्या प्रतिमांमध्ये कोणतीही सिग्नल विकृती आढळली नाही. (ब) एमई ग्रुपमधील कशेरुकाच्या शरीराची सिग्नल वैशिष्ट्ये शॅम-ऑपरेशन ग्रुपमधील आहेत आणि कालांतराने एम्बेडिंग साइटवर कोणताही महत्त्वपूर्ण सिग्नल बदल दिसून येत नाही. (सी) एनपीई गटात, टी 1 डब्ल्यू अनुक्रमात कमी सिग्नल स्पष्टपणे दृश्यमान आहे आणि टी 2 डब्ल्यू अनुक्रमात मिश्रित सिग्नल आणि लो सिग्नल स्पष्टपणे दृश्यमान आहे. 12-आठवड्यांच्या कालावधीपासून 20 आठवड्यांच्या कालावधीपर्यंत, टी 2 डब्ल्यू अनुक्रमातील कमी सिग्नलच्या सभोवतालचे तुरळक उच्च सिग्नल कमी होते.
एनपीई ग्रुपमधील कशेरुकाच्या शरीराच्या रोपण साइटवर स्पष्ट हाडांच्या हायपरप्लासिया पाहिल्या जाऊ शकतात आणि एनपीई गटाच्या तुलनेत हाडांच्या हायपरप्लासिया 12 ते 20 आठवड्यांपर्यंत (अंजीर 2 सी) वेगाने उद्भवते, मॉडेल व्हर्टेब्रलमध्ये कोणताही महत्त्वपूर्ण बदल दिसून येत नाही. शरीर; शॅम ग्रुप आणि मी ग्रुप (चित्र 2 सी) 2 ए, बी).
(अ) रोपण केलेल्या भागावरील कशेरुकाच्या शरीराची पृष्ठभाग खूप गुळगुळीत आहे, छिद्र चांगले बरे होते आणि कशेरुकाच्या शरीरात हायपरप्लासिया नाही. (ब) एमई ग्रुपमधील रोपण केलेल्या साइटचा आकार शॅम ऑपरेशन ग्रुपमध्ये सारखाच आहे आणि कालांतराने रोपण केलेल्या साइटच्या देखाव्यात कोणताही स्पष्ट बदल होत नाही. (सी) एनपीई गटातील रोपण साइटवर हाडांचे हायपरप्लासिया झाले. हाडांच्या हायपरप्लासिया वेगाने वाढली आणि इंटरव्हर्टेब्रल डिस्कद्वारे कॉन्ट्रॅटरल व्हर्टेब्रल बॉडीपर्यंत वाढविली.
हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण हाडांच्या निर्मितीबद्दल अधिक तपशीलवार माहिती प्रदान करते. आकृती 3 एच आणि ई सह डागलेल्या पोस्टऑपरेटिव्ह विभागांची छायाचित्रे दर्शविते. शॅम-ऑपरेशन ग्रुपमध्ये, कोंड्रोसाइट्सची व्यवस्था चांगली केली गेली आणि सेल प्रसार आढळला नाही (चित्र 3 ए). मी गटातील परिस्थिती शॅम-ऑपरेशन ग्रुप (चित्र 3 बी) सारखीच होती. तथापि, एनपीई गटात, रोपण साइटवर (अंजीर. 3 सी) मोठ्या संख्येने कोंड्रोसाइट्स आणि एनपी सारख्या पेशींचे प्रसार दिसून आले;
(अ) शेवटच्या प्लेटच्या जवळ ट्रॅबेकुला पाहिली जाऊ शकते, कोंड्रोसाइट्स एकसमान सेल आकार आणि आकार आणि प्रसार (40 वेळा) सुबकपणे व्यवस्था केली जातात. (ब) एमई ग्रुपमधील इम्प्लांटेशन साइटची स्थिती शॅम ग्रुप प्रमाणेच आहे. ट्रॅबेकुले आणि कोंड्रोसाइट्स पाहिले जाऊ शकतात, परंतु रोपण साइटवर (40 वेळा) कोणतेही स्पष्ट प्रसार होत नाही. (बी) हे पाहिले जाऊ शकते की कोंड्रोसाइट्स आणि एनपी सारख्या पेशी लक्षणीय प्रमाणात वाढतात आणि कोंड्रोसाइट्सचे आकार आणि आकार असमान (40 वेळा) आहेत.
इंटरलेयूकिन 4 (आयएल -4) एमआरएनए, इंटरलेयूकिन 17 (आयएल -17) एमआरएनए आणि इंटरफेरॉन γ (आयएफएन- γ) एमआरएनएची अभिव्यक्ती एनपीई आणि एमई दोन्ही गटांमध्ये पाळली गेली. जेव्हा लक्ष्य जीन्सच्या अभिव्यक्तीच्या पातळीची तुलना केली गेली, तेव्हा एमई ग्रुप आणि शॅम ऑपरेशन ग्रुपच्या तुलनेत एनपीई गटात आयएल -4, आयएल -17 आणि आयएफएन- of च्या जनुक अभिव्यक्तींमध्ये लक्षणीय वाढ झाली (चित्र 4) (पी <0.05). शॅम ऑपरेशन ग्रुपच्या तुलनेत, एमई ग्रुपमधील आयएल -4, आयएल -17, आणि आयएफएन- of चे अभिव्यक्ति पातळी थोडीशी वाढली आणि सांख्यिकीय बदलापर्यंत पोहोचली नाही (पी> ०.०5).
एनपीई ग्रुपमधील आयएल -4, आयएल -17 आणि आयएफएन- of च्या एमआरएनए अभिव्यक्तीने शॅम ऑपरेशन ग्रुप आणि एमई ग्रुप (पी <0.05) पेक्षा लक्षणीय उच्च कल दर्शविला.
याउलट, एमई गटातील अभिव्यक्ती पातळीने कोणताही फरक दर्शविला नाही (पी> 0.05).
बदललेल्या एमआरएनए अभिव्यक्ति पॅटर्नची पुष्टी करण्यासाठी आयएल -4 आणि आयएल -17 विरूद्ध व्यावसायिकरित्या उपलब्ध अँटीबॉडीजचा वापर करून वेस्टर्न ब्लॉट विश्लेषण केले गेले. एमई ग्रुप आणि शॅम ऑपरेशन ग्रुपच्या तुलनेत आकडेवारी 5 ए, बी मध्ये दर्शविल्याप्रमाणे, एनपीई गटातील आयएल -4 आणि आयएल -17 चे प्रथिने पातळी लक्षणीय वाढली (पी <0.05). शॅम ऑपरेशन ग्रुपच्या तुलनेत, एमई ग्रुपमधील आयएल -4 आणि आयएल -17 चे प्रथिने पातळी देखील सांख्यिकीय दृष्टीने महत्त्वपूर्ण बदल (पी> ०.०5) पर्यंत पोहोचण्यात अपयशी ठरले.
(ए) एनपीई गटातील आयएल -4 आणि आयएल -17 चे प्रथिने पातळी एमई ग्रुप आणि प्लेसबो ग्रुप (पी <0.05) पेक्षा लक्षणीय जास्त होते. (बी) वेस्टर्न ब्लॉट हिस्टोग्राम.
शस्त्रक्रियेदरम्यान प्राप्त झालेल्या मानवी नमुन्यांच्या मर्यादित संख्येमुळे, एमसीच्या रोगजनकांवरील स्पष्ट आणि तपशीलवार अभ्यास काहीसे कठीण आहेत. आम्ही त्याच्या संभाव्य पॅथॉलॉजिकल यंत्रणेचा अभ्यास करण्यासाठी एमसीचे प्राणी मॉडेल स्थापित करण्याचा प्रयत्न केला. त्याच वेळी, एनपी ऑटोग्राफ्टद्वारे प्रेरित एमसीच्या कोर्सचे अनुसरण करण्यासाठी रेडिओलॉजिकल मूल्यांकन, हिस्टोलॉजिकल मूल्यांकन आणि आण्विक जैविक मूल्यांकन वापरले गेले. परिणामी, एनपी इम्प्लांटेशन मॉडेलमुळे 12-आठवड्यांपासून 20-आठवड्यांच्या वेळ पॉइंट्स (टी 2 डब्ल्यू सीक्वेन्समध्ये मिश्रित लो सिग्नल आणि टी 2 डब्ल्यू सीक्वेन्समध्ये कमी सिग्नल), आणि हिस्टोलॉजिकल आणि आण्विक, हिस्टोलॉजिकल आणि आण्विक मॉडेलच्या परिणामी सिग्नलच्या तीव्रतेत हळूहळू बदल झाला. जैविक मूल्यांकनांनी रेडिओलॉजिकल अभ्यासाच्या निकालांची पुष्टी केली.
या प्रयोगाचे परिणाम दर्शविते की एनपीई गटातील कशेरुकाच्या शरीराच्या उल्लंघनाच्या ठिकाणी व्हिज्युअल आणि हिस्टोलॉजिकल बदल घडले. त्याच वेळी, आयएल -4, आयएल -१ and आणि आयएफएन- γ जीन्स, तसेच आयएल -4, आयएल -१ and आणि आयएफएन- of चे अभिव्यक्ती पाळली गेली, हे दर्शविते की कशेरुकामध्ये ऑटोलॉगस न्यूक्लियस पल्पोसस टिशूचे उल्लंघन शरीर सिग्नल आणि मॉर्फोलॉजिकल बदलांची मालिका होऊ शकते. हे शोधणे सोपे आहे की प्राण्यांच्या मॉडेलच्या कशेरुकाच्या शरीराची सिग्नल वैशिष्ट्ये (टी 1 डब्ल्यू सीक्वेन्समधील कमी सिग्नल, मिश्रित सिग्नल आणि टी 2 डब्ल्यू सीक्वेन्समधील लो सिग्नल) मानवी कशेरुक पेशींप्रमाणेच आहेत आणि एमआरआय वैशिष्ट्ये देखील आहेत हिस्टोलॉजी आणि स्थूल शरीररचनाच्या निरीक्षणाची पुष्टी करा, म्हणजेच कशेरुकाच्या शरीराच्या पेशींमध्ये बदल प्रगतीशील असतात. जरी तीव्र आघातामुळे उद्भवणारा प्रक्षोभक प्रतिसाद पंक्चरनंतर लवकरच दिसून येऊ शकतो, परंतु एमआरआयच्या निकालांनी असे सिद्ध केले की पंक्चरच्या 12 आठवड्यांनंतर क्रमिकपणे वाढती सिग्नल बदल दिसून आला आणि एमआरआय बदलांच्या पुनर्प्राप्तीची किंवा उलट न करता 20 आठवड्यांपर्यंत कायम राहिला. हे परिणाम सूचित करतात की सशांमध्ये पुरोगामी एमव्ही स्थापित करण्यासाठी ऑटोलोगस व्हर्टेब्रल एनपी ही एक विश्वासार्ह पद्धत आहे.
या पंचर मॉडेलसाठी पुरेसे कौशल्य, वेळ आणि शल्यक्रिया प्रयत्नांची आवश्यकता आहे. प्राथमिक प्रयोगांमध्ये, पॅराव्हर्टेब्रल अस्थिबंधनांच्या संरचनेचे विच्छेदन किंवा अत्यधिक उत्तेजनामुळे कशेरुकाच्या ऑस्टिओफाइट्सची निर्मिती होऊ शकते. जवळच्या डिस्कचे नुकसान किंवा चिडचिडे होऊ नये म्हणून काळजी घेतली पाहिजे. सातत्यपूर्ण आणि पुनरुत्पादक परिणाम मिळविण्यासाठी प्रवेशाची खोली नियंत्रित करणे आवश्यक आहे, आम्ही 3 मिमी लांबीच्या सुईचे म्यान कापून व्यक्तिचलितपणे एक प्लग बनविला. हे प्लग वापरणे कशेरुकाच्या शरीरात एकसमान ड्रिलिंग खोली सुनिश्चित करते. प्राथमिक प्रयोगांमध्ये, ऑपरेशनमध्ये सामील असलेल्या तीन ऑर्थोपेडिक सर्जनमध्ये 16-गेज सुया 18-गेज सुया किंवा इतर पद्धतींसह कार्य करण्यास सुलभ आढळले. ड्रिलिंग दरम्यान अत्यधिक रक्तस्त्राव टाळण्यासाठी, थोड्या काळासाठी सुई ठेवणे अधिक योग्य अंतर्भूत छिद्र प्रदान करेल, असे सूचित करते की एमसीच्या काही प्रमाणात या मार्गाने नियंत्रित केले जाऊ शकते.
जरी बर्‍याच अभ्यासांनी एमसीला लक्ष्य केले असले तरी एमसी 25,26,27 च्या एटिओलॉजी आणि पॅथोजेनेसिसबद्दल फारसे माहिती नाही. आमच्या मागील अभ्यासाच्या आधारे, आम्हाला आढळले की एमसी 12 च्या घटना आणि विकासामध्ये ऑटोइम्यूनिटी महत्त्वपूर्ण भूमिका बजावते. या अभ्यासानुसार आयएल -4, आयएल -17 आणि आयएफएन- of च्या परिमाणात्मक अभिव्यक्तीचे परीक्षण केले गेले, जे प्रतिजैविक उत्तेजनानंतर सीडी 4+ पेशींचे मुख्य भिन्नता मार्ग आहेत. आमच्या अभ्यासामध्ये, नकारात्मक गटाच्या तुलनेत, एनपीई गटात आयएल -4, आयएल -17, आणि आयएफएन- of ची उच्च अभिव्यक्ती होती आणि आयएल -4 आणि आयएल -17 चे प्रथिने पातळी देखील जास्त होते.
वैद्यकीयदृष्ट्या, डिस्क हर्निएशन 28 असलेल्या रूग्णांकडून एनपी पेशींमध्ये आयएल -17 एमआरएनए अभिव्यक्ती वाढविली जाते. निरोगी नियंत्रण 29 च्या तुलनेत वाढलेली आयएल -4 आणि आयएफएन- γ अभिव्यक्ती पातळी देखील तीव्र नॉन-कॉम्प्रेसिव्ह डिस्क हर्निएशन मॉडेलमध्ये आढळली. आयएल -17 जळजळ, ऑटोइम्यून रोग 30 मध्ये ऊतकांच्या दुखापतीमध्ये महत्त्वपूर्ण भूमिका बजावते आणि आयएफएन- γ31 मध्ये रोगप्रतिकारक प्रतिक्रिया वाढवते. एमआरएल/एलपीआर उईस 32 आणि ऑटोइम्यूनिटी-संवेदनाक्षम उंदीर 33 मध्ये वर्धित आयएल -17-मध्यस्थी ऊतकांची दुखापत नोंदविली गेली आहे. आयएल -4 प्रोनिफ्लेमेटरी सायटोकिन्स (जसे की आयएल -1β आणि टीएनएफ α) आणि मॅक्रोफेज एक्टिवेशन 34 च्या अभिव्यक्तीस प्रतिबंधित करू शकते. असे नोंदवले गेले आहे की त्याच वेळी आयएल -17 आणि आयएफएन- of च्या तुलनेत एनपीई गटात आयएल -4 ची एमआरएनए अभिव्यक्ती भिन्न होती; एनपीई गटातील आयएफएन- of ची एमआरएनए अभिव्यक्ती इतर गटांपेक्षा त्यापेक्षा लक्षणीय जास्त होती. म्हणून, आयएफएन- γ उत्पादन एनपी इंटरकॅलेशनद्वारे प्रेरित दाहक प्रतिसादाचे मध्यस्थ असू शकते. अभ्यासानुसार असे दिसून आले आहे की आयएफएन- active सक्रिय प्रकार 1 हेल्पर टी पेशी, नैसर्गिक किलर पेशी आणि मॅक्रोफेजेस 35,36 यासह एकाधिक सेल प्रकारांद्वारे तयार केले जाते आणि रोगप्रतिकारक प्रतिक्रियांना प्रोत्साहन देणारी ही एक दाहक प्रो-इंफ्लेमेटरी सायटोकीन आहे.
हा अभ्यास सूचित करतो की एमसीच्या घटना आणि विकासामध्ये ऑटोइम्यून प्रतिसाद सामील होऊ शकतो. लुओमा एट अल. असे आढळले की एमसी आणि प्रमुख एनपीची सिग्नल वैशिष्ट्ये एमआरआयवर समान आहेत आणि दोघेही टी 2 डब्ल्यू सीक्वेन्स 38 मध्ये उच्च सिग्नल दर्शवितात. काही साइटोकिन्सची आयएल -139 सारख्या एमसीच्या घटनेशी जवळून संबंधित असल्याची पुष्टी केली गेली आहे. मा इट अल. एनपीच्या ऊर्ध्वगामी किंवा खालच्या दिशेने एमसी 12 च्या घटनेवर आणि विकासावर मोठा प्रभाव असू शकतो असे सुचविले. बॉबेको 40 आणि हर्झबिन एट अल .41 ने नोंदवले की एनपी एक रोगप्रतिकारक ऊतक आहे जो जन्मापासून संवहनी अभिसरणात प्रवेश करू शकत नाही. एनपी प्रोट्रेशन्सने रक्तपुरवठ्यात परदेशी संस्था ओळखली, ज्यायोगे स्थानिक ऑटोइम्यून रिएक्शन 42 मध्ये मध्यस्थी केली जाते. ऑटोइम्यून प्रतिक्रिया मोठ्या संख्येने रोगप्रतिकारक घटकांना प्रवृत्त करू शकतात आणि जेव्हा हे घटक सतत ऊतींच्या संपर्कात असतात तेव्हा ते सिग्नलिंग 43 मध्ये बदल होऊ शकतात. या अभ्यासामध्ये, आयएल -4, आयएल -१ and आणि आयएफएन- of चे ओव्हरएक्सप्रेशर हे सामान्य रोगप्रतिकारक घटक आहेत, जे पुढे एनपी आणि एमसीएस 44 मधील जवळचे संबंध सिद्ध करतात. हे प्राणी मॉडेल एनपी ब्रेकथ्रू आणि शेवटच्या प्लेटमध्ये प्रवेशाची नक्कल करते. या प्रक्रियेमुळे एमसीवर स्वयंचलितपणाचा प्रभाव दिसून आला.
अपेक्षेप्रमाणे, हे प्राणी मॉडेल आम्हाला एमसीचा अभ्यास करण्यासाठी संभाव्य व्यासपीठ प्रदान करते. तथापि, या मॉडेलला अजूनही काही मर्यादा आहेत: प्रथम, प्राण्यांच्या निरीक्षणाच्या टप्प्यात, काही इंटरमीडिएट-स्टेज ससे हिस्टोलॉजिकल आणि आण्विक जीवशास्त्र चाचणीसाठी सुसंवादित करणे आवश्यक आहे, म्हणून काही प्राणी कालांतराने “वापरात पडतात”. दुसरे म्हणजे, या अभ्यासामध्ये तीन वेळेचे गुण निश्चित केले गेले असले तरी, दुर्दैवाने, आम्ही केवळ एक प्रकारचे एमसी (मॉडिक प्रकार I चेंज) मॉडेल केले आहे, म्हणून मानवी रोगाच्या विकास प्रक्रियेचे प्रतिनिधित्व करणे पुरेसे नाही आणि अधिक वेळ गुण निश्चित करणे आवश्यक आहे सर्व सिग्नल बदलांचे चांगले निरीक्षण करा. तिसर्यांदा, ऊतकांच्या संरचनेत बदल खरोखरच हिस्टोलॉजिकल स्टेनिंगद्वारे दर्शविले जाऊ शकतात, परंतु काही विशिष्ट तंत्र या मॉडेलमधील मायक्रोस्ट्रक्चरल बदल अधिक चांगल्या प्रकारे प्रकट करू शकतात. उदाहरणार्थ, ध्रुवीकृत प्रकाश मायक्रोस्कोपीचा वापर ससा इंटरव्हर्टेब्रल डिस्क 45 मध्ये फायब्रोकार्टिलेजच्या निर्मितीचे विश्लेषण करण्यासाठी केला गेला. एमसी आणि एंडप्लेटवर एनपीच्या दीर्घकालीन प्रभावांसाठी पुढील अभ्यासाची आवश्यकता आहे.
पंचवीस नर न्यूझीलंड व्हाइट ससे (वजन सुमारे 2.5-3 किलो, वय 3-3.5 महिने) यादृच्छिकपणे शॅम ऑपरेशन ग्रुप, स्नायू रोपण गट (एमई ग्रुप) आणि मज्जातंतू रूट इम्प्लांटेशन ग्रुप (एनपीई ग्रुप) मध्ये विभागले गेले. सर्व प्रायोगिक प्रक्रियेस टियानजिन हॉस्पिटलच्या नीतिशास्त्र समितीने मान्यता दिली आणि मंजूर मार्गदर्शक तत्त्वांच्या काटेकोरपणे प्रयोगात्मक पद्धती केल्या गेल्या.
एस. सोबाजीमा 46 च्या शस्त्रक्रिया तंत्रात काही सुधारणा करण्यात आल्या आहेत. प्रत्येक ससाला बाजूकडील रिकाम्सी स्थितीत ठेवण्यात आले होते आणि पोस्टरोलेट्रल रेट्रोपेरिटोनियल दृष्टिकोन वापरुन सलग पाच कमरेसंबंधी इंटरव्हर्टेब्रल डिस्क (आयव्हीडी) च्या आधीची पृष्ठभाग उघडकीस आणली गेली. प्रत्येक ससाला सामान्य est नेस्थेसिया (20% युरेथेन, कान शिराद्वारे 5 मिली/किलो) देण्यात आला. पिल्विक ब्रिम, पॅराव्हर्टेब्रल स्नायूंच्या 2 सेमी व्हेंट्रलपर्यंत फासळ्यांच्या खालच्या काठावरुन रेखांशाचा त्वचेची चीर बनविली गेली. एल 1 ते एल 6 पर्यंतच्या उजव्या एंटेरोलेट्रल मणक्याचे ओव्हरलाइंग त्वचेखालील ऊतक, रेट्रोपेरिटोनियल टिशू आणि स्नायू (चित्र 6 ए) च्या तीव्र आणि बोथट विच्छेदनामुळे उघडकीस आले. L5-L6 डिस्क पातळीसाठी श्रोणीचा आधार म्हणून पेल्विक ब्रिमचा वापर करून डिस्क पातळी निश्चित केली गेली. एल 5 व्हर्टेब्राच्या शेवटच्या प्लेटजवळील छिद्र ड्रिल करण्यासाठी 16-गेज पंचर सुई वापरा 3 मिमी (चित्र 6 बी) खोलीपर्यंत. एल 1-एल 2 इंटरव्हर्टेब्रल डिस्क (चित्र 6 सी) मध्ये ऑटोलॉगस न्यूक्लियस पल्पोससची आकांक्षा देण्यासाठी 5-एमएल सिरिंज वापरा. प्रत्येक गटाच्या आवश्यकतेनुसार न्यूक्लियस पल्पोसस किंवा स्नायू काढा. ड्रिल होल सखोल झाल्यानंतर, शल्यक्रिया दरम्यान कशेरुकाच्या शरीराच्या पेरीओस्टियल ऊतकांना नुकसान न करण्याची काळजी घेत खोल फॅसिआ, वरवरच्या फॅसिआ आणि त्वचेवर शोषक sutures ठेवले जातात.
(अ) एल 5 - एल 6 डिस्क पोस्टरोलेट्रल रेट्रोपेरिटोनियल पध्दतीद्वारे उघडकीस आली आहे. (बी) एल 5 एंडप्लेटजवळ एक छिद्र ड्रिल करण्यासाठी 16-गेज सुई वापरा. (सी) ऑटोलॉगस एमएफची कापणी केली जाते.
सामान्य est नेस्थेसिया इयर व्हेनद्वारे 20% युरेथेन (5 मिली/किलो) दिले गेले आणि कमरेसंबंधी मणक्याचे रेडियोग्राफ्स 12, 16 आणि 20 आठवड्यांनंतर पोस्टऑपरेटिव्हने पुनरावृत्ती केली गेली.
शस्त्रक्रियेनंतर 12, 16 आणि 20 आठवड्यांनंतर केटामाइन (25.0 मिलीग्राम/कि.ग्रा.) आणि इंट्राव्हेनस सोडियम पेंटोबार्बिटल (1.2 ग्रॅम/किलो) च्या इंट्रामस्क्युलर इंजेक्शनद्वारे सशांचा बळी दिला गेला. हिस्टोलॉजिकल विश्लेषणासाठी संपूर्ण मणक्याचे काढले गेले आणि वास्तविक विश्लेषण केले गेले. परिमाणवाचक रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन (आरटी-क्यूपीसीआर) आणि वेस्टर्न ब्लॉटिंग रोगप्रतिकारक घटकांमधील बदल शोधण्यासाठी वापरले गेले.
ऑर्थोगोनल लिंब कॉइल रिसीव्हरसह सुसज्ज 3.0 टी क्लिनिकल मॅग्नेट (जीई मेडिकल सिस्टम्स, फ्लॉरेन्स, एससी) वापरून सशांमध्ये एमआरआय परीक्षा घेण्यात आल्या. कानाच्या शिराद्वारे 20% युरेथेन (5 मिली/कि.ग्रा.) सह ससे भूल दिले गेले आणि नंतर 5 इंच व्यासाच्या परिपत्रक पृष्ठभागाच्या कॉइल (जीई मेडिकल सिस्टम्स) वर मध्यभागी असलेल्या लंबर प्रदेशासह चुंबकाच्या आत सुपिन ठेवले. एल 3-एल 4 ते एल 5-एल 6 पर्यंत लंबर डिस्कचे स्थान परिभाषित करण्यासाठी कोरोनल टी 2-वेट लोकलायझर प्रतिमा (टीआर, 1445 एमएस; टीई, 37 एमएस) प्राप्त केल्या. धनुष्य विमान टी 2-भारित स्लाइस खालील सेटिंग्जसह प्राप्त केले गेले: 2200 एमएसच्या पुनरावृत्ती वेळ (टीआर) आणि 70 एमएस, मॅट्रिक्सच्या प्रतिध्वनी वेळ (टीई) सह वेगवान स्पिन-इको सीक्वेन्स; 260 आणि आठ उत्तेजनांचे व्हिज्युअल फील्ड; कटिंगची जाडी 2 मिमी होती, अंतर 0.2 मिमी होते.
शेवटचा फोटो काढल्यानंतर आणि शेवटचा ससा मारल्यानंतर, हिस्टोलॉजिकल तपासणीसाठी लबाडी, स्नायू-एम्बेडेड आणि एनपी डिस्क काढून टाकल्या गेल्या. ऊतक 1 आठवड्यासाठी 10% तटस्थ बफर्ड फॉर्मेलिनमध्ये निश्चित केले गेले होते, जे इथिलेनेडिआमिनेटेटेट्रॅसेटिक acid सिड आणि पॅराफिन विभागले गेले. टिशू ब्लॉक्स पॅराफिनमध्ये एम्बेड केले गेले आणि मायक्रोटोमचा वापर करून धनुष्य विभाग (5 μ मी जाड) मध्ये कापले गेले. विभाग हेमॅटोक्सिलिन आणि इओसिन (एच आणि ई) सह डाग होते.
प्रत्येक गटातील सशांकडून इंटरव्हर्टेब्रल डिस्क गोळा केल्यानंतर, निर्मात्याच्या सूचनेनुसार आणि एक इम्प्रॉम II रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन सिस्टम (प्रोमेगा इंक. , मॅडिसन, डब्ल्यूआय, यूएसए). रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्शन केले गेले.
निर्मात्याच्या सूचनेनुसार आरटी-क्यूपीसीआर प्रिझम 00 73०० (अप्लाइड बायोसिस्टम इंक. पीसीआर प्रतिक्रिया खंड 20 μl होता आणि त्यात 1.5 μl पातळ सीडीएनए आणि प्रत्येक प्राइमरच्या 0.2 μm होते. प्राइमर ऑलिगोपरफेक्ट डिझायनर (इनविट्रोजन, व्हॅलेन्सिया, सीए) यांनी डिझाइन केले होते आणि नानजिंग गोल्डन स्टीवर्ट बायोटेक्नॉलॉजी कंपनी, लि. (चीन) (टेबल 1) यांनी निर्मित केले होते. खालील थर्मल सायकलिंगची परिस्थिती वापरली गेली: प्रारंभिक पॉलिमरेज एक्टिवेशन स्टेप 2 मिनिटांसाठी 94 ° से. 72 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 1 मिनिटासाठी मोजमाप केले गेले. सर्व नमुने तीन वेळा वाढविले गेले आणि सरासरी मूल्य आरटी-क्यूपीसीआर विश्लेषणासाठी वापरले गेले. फ्लेक्सस्टेशन 3 (आण्विक उपकरणे, सनीवाले, सीए, यूएसए) वापरून एम्प्लिफिकेशन डेटाचे विश्लेषण केले गेले. आयएल -4, आयएल -१, आणि आयएफएन- γ जनुक अभिव्यक्ती अंतर्जात नियंत्रण (एसीटीबी) वर सामान्य केली गेली. लक्ष्य एमआरएनएची संबंधित अभिव्यक्ती पातळी 2-ΔΔCT पद्धतीचा वापर करून मोजली गेली.
रिपा लिसिस बफर (प्रथिने आणि फॉस्फेटस इनहिबिटर कॉकटेल असलेले) टिश्यू होमोजनायझर वापरुन एकूण प्रथिने काढली गेली आणि नंतर ऊतक मोडतोड काढण्यासाठी 4 डिग्री सेल्सिअस तापमानात 20 मिनिटांसाठी 13,000 आरपीएमवर सेंट्रीफ्यूज केले. पन्नास मायक्रोग्राम प्रथिने प्रति लेन लोड केले गेले, 10% एसडीएस-पृष्ठाने विभक्त केले आणि नंतर पीव्हीडीएफ पडदामध्ये हस्तांतरित केले. खोलीच्या तपमानावर 1 तासासाठी 0.1% टूव्हन 20 ट्रीस-बफर सलाईन (टीबीएस) मध्ये 5% नॉनफॅट कोरड्या दुधामध्ये ब्लॉकिंग केले गेले. ससा अँटी-डेकोरिन प्राइमरी anti न्टीबॉडी (पातळ 1: 200; बोस्टर, वुहान, चीन) (पातळ 1: 200; बायोस, बीजिंग, चीन) रात्रभर 4 डिग्री सेल्सिअस तापमानात पडदा पडला आणि दुसर्‍या दिवशी प्रतिक्रिया दिली; दुय्यम प्रतिपिंडे (बकरी-विरोधी ससा इम्युनोग्लोबुलिन जी 1: 40,000 सौम्यतेवर) खोलीच्या तपमानावर 1 तासासाठी हॉर्सराडिश पेरोक्सिडेस (बोस्टर, वुहान, चीन) सह एकत्रित. एक्स-रे इरिडिएशननंतर केमिल्युमिनेसेंट झिल्लीवर केमिलोमिनेसेन्सने वाढलेल्या केमिलोमिनेसेन्सद्वारे वेस्टर्न ब्लॉट सिग्नल आढळले. डेन्सिटोमेट्रिक विश्लेषणासाठी, बँडस्कॅन सॉफ्टवेअरचा वापर करून ब्लॉट्स स्कॅन आणि प्रमाणित केले गेले आणि ट्यूबुलिन इम्युनोरएक्टिव्हिटीच्या लक्ष्य जनुक इम्युनोरएक्टिव्हिटीचे प्रमाण म्हणून परिणाम व्यक्त केले गेले.
एसपीएसएस 16.0 सॉफ्टवेअर पॅकेज (एसपीएसएस, यूएसए) वापरून सांख्यिकीय गणना केली गेली. अभ्यासादरम्यान गोळा केलेला डेटा म्हणजेच मानक विचलन (म्हणजेच एसडी) म्हणून व्यक्त केला गेला आणि दोन गटांमधील फरक निश्चित करण्यासाठी भिन्नता (एनोवा) च्या एक-मार्ग पुनरावृत्ती केलेल्या उपाययोजनांचे विश्लेषण करून विश्लेषण केले. पी <0.05 सांख्यिकीय दृष्टीने महत्त्वपूर्ण मानले गेले.
अशाप्रकारे, कशेरुकाच्या शरीरात ऑटोलॉगस एनपींना रोपण करून आणि मॅक्रोआनाटॉमिकल निरीक्षण, एमआरआय विश्लेषण, हिस्टोलॉजिकल मूल्यांकन आणि आण्विक जैविक विश्लेषणाद्वारे एमसीच्या प्राण्यांच्या मॉडेलची स्थापना मानवी एमसीच्या यंत्रणेचे मूल्यांकन आणि समजून घेण्यासाठी एक महत्त्वपूर्ण साधन बनू शकते हस्तक्षेप.
हा लेख कसा उद्धृत करावा: हान, सी. इत्यादी. लंबर रीढ़ाच्या सबकॉन्ड्रल हाडात ऑटोलॉगस न्यूक्लियस पल्पोसस रोपण करून मोडिक बदलांचे एक प्राणी मॉडेल स्थापित केले गेले. विज्ञान. रिप. 6, 35102: 10.1038/एसआरईपी 35102 (2016).
वेईशाप्ट, डी., झेनेट्टी, एम., हॉडलर, जे. ? दर. रेडिओलॉजी 209, 661–666, डोई: 10.1148/रेडिओलॉजी .209.3.98444656 (1998).
केजेर, पी., कोर्स्होम, एल., बेंडिक्स, टी. युरोपियन स्पाइन जर्नल: युरोपियन स्पाइन सोसायटी, युरोपियन सोसायटी ऑफ स्पाइनल विकृतीचे अधिकृत प्रकाशन आणि ग्रीवाच्या मणक्याचे संशोधन 15, 1312–1319, डीओआय: 10.1007/एस 100586-006-0185-एक्स (2006) चे अधिकृत प्रकाशन.
कुईस्मा, एम., इत्यादी. कमरेसंबंधी कशेरुकाच्या एंडप्लेट्समध्ये मॉडिक बदलः मध्यमवयीन पुरुष कामगारांमध्ये कमी पाठदुखी आणि सायटिकाचा प्रसार आणि संबद्धता. मणक्याचे 32, 1116–1122, doi: 10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
डी रुस, ए., क्रेसेल, एच., स्प्रीटझर, के. अजर. अमेरिकन जर्नल ऑफ रेडिओलॉजी 149, 531–534, डोई: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
मॉडिक, एमटी, स्टीनबर्ग, पीएम, रॉस, जेएस, मसारीक, टीजे आणि कार्टर, जेआर डीजेनेरेटिव्ह डिस्क रोग: एमआरआयसह कशेरुकाच्या मज्जातंतूंचे मूल्यांकन. रेडिओलॉजी 166, 193–199, डोई: 10.1148/रेडिओलॉजी .166.1.3336678 (1988).
मॉडिक, एमटी, मासेरिक, टीजे, रॉस, जेएस आणि कार्टर, डीजेनेरेटिव्ह डिस्क रोगाचे जेआर इमेजिंग. रेडिओलॉजी 168, 177–186, डोई: 10.1148/रेडिओलॉजी .168.1.3289089 (1988).
जेन्सेन, टीएस, इत्यादी. सामान्य लोकांमध्ये निओव्हर्टेब्रल एंडप्लेट (मोडिक) सिग्नल बदलांचे भविष्यवाणी. युरोपियन स्पाइन जर्नल: युरोपियन स्पाइन सोसायटी, युरोपियन सोसायटी ऑफ स्पाइनल विकृतीचे अधिकृत प्रकाशन आणि ग्रीवाच्या स्पाइन रिसर्च, विभाग 19, 129-135, डीओआय: 10.1007/एस 100586-009-1184-5 (2010).
लंबर डिस्क हर्निएशननंतर अल्बर्ट, एचबी आणि मॅनिश, के. मॉडिक बदल. युरोपियन स्पाइन जर्नल: युरोपियन स्पाइन सोसायटीचे अधिकृत प्रकाशन, युरोपियन सोसायटी ऑफ स्पाइनल विकृती आणि ग्रीवाच्या स्पाइन रिसर्चसाठी युरोपियन सोसायटी 16, 977–982, डीओआय: 10.1007/एस 100586-007-0336-8 (2007).
कर्ट्टुला, एल., लुओमा, के., व्हेम्मा, टी., ग्रोनब्लाड, एम., आणि कापा, ई. मॉडिक प्रकार I बदल वेगाने प्रगतीशील विकृतीकरण डिस्क डीजेनेरेशनचा अंदाज लावू शकतात: 1 वर्षाचा संभाव्य अभ्यास. युरोपियन स्पाइन जर्नल 21, 1135–1142, डीओआय: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
हू, झेडजे, झाओ, एफडी, फॅन, एक्सक्यू आणि फॅन, एसडब्ल्यू मॉडिक बदल: कमरेसंबंधी डिस्क र्हासमध्ये संभाव्य कारणे आणि योगदान. वैद्यकीय गृहीतक 73, 930-932, डोई: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
क्रोक, एचव्ही अंतर्गत डिस्क फुटणे. 50 वर्षांहून अधिक डिस्क प्रॉलेप्स समस्या. मणक्याचे (फिला पीए 1976) 11, 650–653 (1986).